Astrea 糖蛋白分離純化——APB親和填料
- 公司名稱(chēng) 北京西美杰科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) Astrea
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 代理商
- 更新時(shí)間 2025/4/24 16:44:12
- 訪問(wèn)次數(shù) 20
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北京西美杰科技有限公司（Beijing XMJ Scientific Co.,Ltd，以下簡(jiǎn)稱(chēng)西美杰）于2006年成立，由留美歸國(guó)生物領(lǐng)域?qū)I(yè)人士創(chuàng)辦。西美杰堅(jiān)持自己的經(jīng)營(yíng)理念，勤奮踏實(shí)地整合全球產(chǎn)品資源與技術(shù)資源，為高校、科研院所的科研工作者以及生物制品生產(chǎn)企業(yè)提供一站式產(chǎn)品服務(wù)方案，幫助科研及企業(yè)單位縮短科研時(shí)間、節(jié)約科研成本、提升科研水平、增強(qiáng)企業(yè)市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力。
西美杰以其開(kāi)放、進(jìn)取、誠(chéng)信、專(zhuān)業(yè)等優(yōu)勢(shì)與國(guó)外多家試劑、原料和技術(shù)供應(yīng)商建立了長(zhǎng)期穩(wěn)定的合作伙伴關(guān)系，成為了眾多國(guó)際廠商的中國(guó)區(qū)總代理、一級(jí)代理和中國(guó)授權(quán)代表處。更與藥用輔料生產(chǎn)商長(zhǎng)期戰(zhàn)略性合作，共同開(kāi)展制藥輔料的進(jìn)口注冊(cè)與市場(chǎng)開(kāi)拓。
業(yè)務(wù)的迅猛發(fā)展促進(jìn)了西美杰內(nèi)部組織架構(gòu)的不斷優(yōu)化，針對(duì)科研客戶與企業(yè)客戶的不同需求，西美杰建立了科研與工業(yè)兩支獨(dú)立的營(yíng)銷(xiāo)團(tuán)隊(duì)，分別配備專(zhuān)業(yè)的技術(shù)支持和客服人員，力求為不同類(lèi)型的客戶提供前沿專(zhuān)業(yè)的解決方案以及產(chǎn)品與高效的服務(wù)。
經(jīng)過(guò)十多年的發(fā)展，西美杰得到了眾多客戶的支持與信賴(lài)，在業(yè)務(wù)上實(shí)現(xiàn)了迅猛發(fā)展，以專(zhuān)業(yè)的服務(wù)成為多家跨國(guó)企業(yè)中國(guó)區(qū)研發(fā)與生產(chǎn)基地、制藥企業(yè)與診斷企業(yè)以及中科院系統(tǒng)、軍科院系統(tǒng)、醫(yī)科院系統(tǒng)、清華大學(xué)、北京大學(xué)、北大醫(yī)學(xué)部、首都醫(yī)科大學(xué)等高校與科研院所采購(gòu)平臺(tái)的供貨商。
一、西美杰主營(yíng)產(chǎn)品線與代理品牌
1. 免疫學(xué)：二抗和底物生產(chǎn)商KPL的中國(guó)代理；抗體生產(chǎn)商Lifespan，Abnova，Cali-Bio，Mybiosource等近10個(gè)品牌的中國(guó)一級(jí)代理。
2. 分子與細(xì)胞生物學(xué)：德國(guó)生化試劑Panreac-AppliChem、德國(guó)核苷酸原料品牌Jena Bioscience等中國(guó)總代理；氧化應(yīng)激檢測(cè)Cell Biolabs、轉(zhuǎn)染試劑專(zhuān)家 Mirus、動(dòng)物免注射給藥工具Alzet等中國(guó)總代理或一級(jí)代理。
3. 植物學(xué)：美國(guó)組培試劑品牌Phytotech中國(guó)總代理；植物抗體生產(chǎn)商Agrisera、組培抗菌劑產(chǎn)品PPM供應(yīng)商PCT中國(guó)一級(jí)代理。
4. 蛋白結(jié)構(gòu)學(xué)：特色蛋白結(jié)晶試劑與耗材Jena Bioscience、Hampton、Anatrace、MiTeGen。
5. 生物制藥：覆蓋制藥從上游到下游環(huán)節(jié)，全球藥用輔料供應(yīng)商Pfanstiehl(全球重磅生物藥中7個(gè)藥物的輔料供應(yīng)商)、細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)添加物KERRY、歐洲制藥生化原料供應(yīng)商Panreac-AppliChem，以及HCP/Prot A/BSA殘留檢測(cè)試劑盒生產(chǎn)商Cygnus等中國(guó)制藥領(lǐng)域代理。
6. 診斷原料：二抗和底物生產(chǎn)商KPL以及自身免疫抗原抗體生產(chǎn)商Arotec中國(guó)總代理。
二、西美杰主營(yíng)產(chǎn)品領(lǐng)域與服務(wù)
1. 科研/研發(fā)產(chǎn)品及服務(wù)項(xiàng)目
研究領(lǐng)域上：覆蓋生物化學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、蛋白組學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、藥物篩選；
研究對(duì)象上：覆蓋人類(lèi)、動(dòng)物與模式動(dòng)物、植物等物種；
產(chǎn)品結(jié)構(gòu)上：從基因到蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與in vivo/in vitro功能的分析和研究；
產(chǎn)品種類(lèi)上：從試劑到特殊工具和耗材。
2. 生物工業(yè)生產(chǎn)原料、藥用輔料
覆蓋培養(yǎng)基生產(chǎn)、生物制藥/疫苗生產(chǎn)細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)、無(wú)抗生素篩選原核表達(dá)系統(tǒng)、HCP/Prot A/BSA殘留檢測(cè)試劑盒、檢測(cè)抗原/抗體/底物/BSA、診斷工業(yè)原料。
3. 技術(shù)服務(wù)、合約開(kāi)發(fā)與技術(shù)轉(zhuǎn)讓
穩(wěn)定表達(dá)CHO細(xì)胞株的構(gòu)建與工藝開(kāi)發(fā)；
培養(yǎng)基優(yōu)化；
多肽合成、抗體定制、病毒包裝等；
藥物功能篩選服務(wù)KinaseProfiler™等。
4. 代理進(jìn)口服務(wù)
西美杰擁有自主進(jìn)出口資質(zhì)，和自有國(guó)際物流運(yùn)輸系統(tǒng)，為中國(guó)眾多大型科研機(jī)構(gòu)提供免稅科研儀器和試劑的代理進(jìn)口服務(wù)，我們樂(lè)意為客戶代理進(jìn)口在中國(guó)沒(méi)有銷(xiāo)售代理的產(chǎn)品。
西美杰將繼續(xù)秉承誠(chéng)信、專(zhuān)業(yè)經(jīng)營(yíng)之風(fēng)，整合全球優(yōu)勢(shì)產(chǎn)品資源、技術(shù)資源和我公司的服務(wù)資源，為高校、科研院所的科研工作者以及生物制品生產(chǎn)企業(yè)提供一站式的服務(wù)。
生化試劑，抗體，試劑盒，耗材，培養(yǎng)基，植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，凝膠
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
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糖蛋白分離純化——APB親和填料
蛋白糖基化是一種非常重要的蛋白質(zhì)后修飾方式。糖基化對(duì)蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)和生物功能都可以產(chǎn)生重大影響，生物藥分子的糖基化可能決定了其臨床效果，因此糖基化在生物藥生產(chǎn)中是一個(gè)關(guān)鍵質(zhì)量屬性，必須在開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)過(guò)程中密切監(jiān)視，并在工藝中特異性分離或者去除糖基化分子。近些年來(lái)，硼酸親和技術(shù)在糖蛋白純化領(lǐng)域得到了快速的發(fā)展，其親和性引起了研究人員的極大關(guān)注。由于硼酸基于與順式二醇基團(tuán)可發(fā)生可控的可逆共價(jià)鍵合反應(yīng)，后者在糖蛋白的糖鏈結(jié)構(gòu)中廣泛存在，因而硼酸親和技術(shù)常被用做是一種選擇性富集分離順式二醇化合物的有效提純手段。硼酸親和作用的工作原理如下圖。
APB親和填料是由Astrea Bioseparations公司推出的配基為氨基苯基硼酸鹽的親和層析填料（Aminophenylboronate，簡(jiǎn)稱(chēng)APB），特別適用于糖蛋白的純化，或從非糖基化分子中去除糖蛋白和碳水化合物雜質(zhì)，從而應(yīng)對(duì)糖蛋白純化工藝中的各種挑戰(zhàn)，此外，APB填料還可用于純化和去除某些酶，例如硼酸基團(tuán)對(duì)活性位點(diǎn)具有親和性的蛋白酶和水解酶等。
APB親和填料有兩種不同的基架可選擇，其中Aminophenylboronate P6XL采用的是Astrea專(zhuān)有的Purabead® P6XL近單分散瓊脂糖微球來(lái)生產(chǎn)高度穩(wěn)定的交聯(lián)瓊脂糖基架。 Purabead®產(chǎn)品具有非常均勻的粒徑，可在低背壓條件下實(shí)現(xiàn)可重現(xiàn)的層析柱裝填和高流速。因此，Aminophenylboronate P6XL 是生物工藝應(yīng)用的親和填料。Aminophenylboronate A6XL是Astrea的原創(chuàng)產(chǎn)品，該填料的瓊脂糖基質(zhì)具有更寬的粒度分布，更適合小規(guī)?；蛟\斷應(yīng)用。兩種基架都是經(jīng)過(guò)優(yōu)化的，有相同的穩(wěn)定的配基和偶聯(lián)物，都適用于各種生物制品的分離和純化。
APB親合填料產(chǎn)品特點(diǎn)
適用于親和純化或去除糖蛋白及聚糖
高純度m-氨基苯硼酸鹽配基
配基通過(guò)順式二醇選擇性結(jié)合至碳水化合物基團(tuán)。
高動(dòng)態(tài)結(jié)合載量
填料穩(wěn)定性好，使用壽命長(zhǎng)
可耐受0.5 M NaOH清潔，允許數(shù)百次循環(huán)使用
符合ISO 9001標(biāo)準(zhǔn)，批次穩(wěn)定性重復(fù)性好
提供全面的法規(guī)支持文件（RSF），支持GMP生產(chǎn)和商業(yè)化申報(bào)
已有多個(gè)受監(jiān)管的生物制藥生產(chǎn)和醫(yī)療診斷領(lǐng)域用戶使用。
pH穩(wěn)定性:
APB親和填料在pH 3-13（連續(xù)暴露）范圍內(nèi)穩(wěn)定，并且可承受pH 14.0的間歇暴露。
在室溫條件下，在從pH 0.0(1 M HCl) 到pH 14.0 (1M NaOH) 的一系列測(cè)試溶液中孵育的APB A6XL的pH穩(wěn)定性曲線。收集上清液樣品并以連續(xù)暴露1周至1年的特定時(shí)間間隔測(cè)定配基的脫落情況。
流速
APB P6XL的均勻粒徑使該吸附填料能夠在高線性流速下使用?？梢允褂酶哌_(dá)500 cm/h的操作流速，盡管在層析柱上樣和洗脫期間的流速通常在50–200 cm/h范圍內(nèi)。
APB P6XL（直徑3.2 cm x床高15 cm）的壓力-流速曲線。
結(jié)合載量
APB P6XL/A6XL對(duì)糖蛋白的結(jié)合載量范圍為10–20 μmol/g，對(duì)碳水化合物的結(jié)合載量高達(dá)30 μmol/g。
操作條件
糖蛋白與APB親和填料的結(jié)合在低至中等離子強(qiáng)度（10–300 mM）和弱堿性pH條件（pH 范圍8.0–9.5）下最佳?？梢允褂昧姿猁}制備的緩沖液，推薦使用硼酸鹽和甘氨酸進(jìn)行柱平衡。建議結(jié)合流速在50–150 cm/h之間。吸附填料的結(jié)合載量取決于樣品的性質(zhì)，對(duì)于糖蛋白來(lái)說(shuō)，通常在10–20 μmol/g的范圍內(nèi)。
通過(guò)使用低pH緩沖液或通過(guò)使用競(jìng)爭(zhēng)性二醇，可以從APB親和填料中洗脫結(jié)合的蛋白質(zhì)?？梢允褂胮H4.0的0.1 M甘氨酸/HCl或0.1 M醋酸鹽緩沖液降低pH值進(jìn)行洗脫。對(duì)于酸不穩(wěn)定性蛋白質(zhì)，可以使用合適的競(jìng)爭(zhēng)性二醇，例如20–200 mM山梨醇，在中性pH緩沖液中進(jìn)行洗脫。
糖蛋白分離純化——APB親和填料
APB親和填料參數(shù)
步驟 | 條件 |
平衡/裝柱緩沖液 | 50 mM磷酸鈉，pH 9.0緩沖液 |
蛋白質(zhì)制備 | 在平衡緩沖液中制備蛋白質(zhì)，并用≤0.45 μm的濾器預(yù)過(guò)濾。 |
操作流速 | 50-200 cm/h |
洗脫 | 20–200 mM山梨醇或0.1 M甘氨酸/HCI或0.1M醋酸緩沖液，pH 4.0 |
CIP | 0.5–1.0 M氫氧化鈉 |
預(yù)平衡 | 平衡緩沖液 |
消毒 | 0.5 M NaOH |
儲(chǔ)存 | 20% 乙醇 |
應(yīng)用案例
用APB P6XL純化胎球蛋白
胎球蛋白是胎牛血清中的主要59 kDa糖蛋白，含有三個(gè)N-鏈和O-鏈碳水化合物側(cè)鏈。該案例介紹了使用APB P6XL層析柱從商品化粗溶液中純化胎球蛋白。
層析色譜圖
胎球蛋白層析條件參數(shù)：
層析柱高度：4 cm
柱體積：3.1 mL
線性流速：50 cm/h
平衡&漂洗緩沖液：50 mM磷酸鈉，pH 9.0
洗脫：山梨醇梯度(0–200mM)
消毒：1M NaOH
重組糖蛋白的捕獲
APB層析填料特別適用于糖蛋白的捕獲和純化。下圖展示了一個(gè)經(jīng)典的親和純化色譜圖，其中有一個(gè)大的流穿和一個(gè)小的離散洗脫峰。在50 mM山梨醇洗脫后達(dá)到目標(biāo)糖蛋白回收。
層析色譜圖
層析條件參數(shù)：
層析柱：直徑1.0 cmx柱床高7.4 cm
平衡漂洗/緩沖液：50 mM甘氨酸/NaOH pH 9.0
洗脫：50 mM 磷酸鹽緩沖液，0-200 mM山梨醇梯度
消毒：0.5 M氫氧化鈉
流速：200 cm/h
APB A6XL純化的糖蛋白Western blot結(jié)果圖（泳道1 分子量marker，泳道2 上樣到APB A6XL的樣品，泳道3 流穿液，泳道4-8 梯度洗脫液）
訂購(gòu)信息
Aminophenylboronate P6XL
貨號(hào) | 填料規(guī)格 | 產(chǎn)品形式 |
3355-00025 | 25 mL | 散裝填料 |
3355-00100 | 100 mL | |
3355-00500 | 500 mL | |
3355-01000 | 1 L | |
3355-05000 | 5 L | |
3355-10000 | 10 L | |
6716 | 1 x 1 mL | 預(yù)裝柱 |
6616 | 4 x 1 mL | |
6717 | 1 x 5 mL | |
6617 | 4 x 5 mL |
Aminophenylboronate A6XL
貨號(hào) | 填料規(guī)格 | 產(chǎn)品形式 |
0355-00025 | 25 mL | 散裝填料 |
0355-00100 | 100 mL | |
0355-00500 | 500 mL | |
0355-01000 | 1 L |
Astrea Bioseparations于1987年孵化自劍橋大學(xué)，擁有超過(guò)30年層析介質(zhì)研發(fā)和生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)，是層析介質(zhì)產(chǎn)品與服務(wù)供應(yīng)商。目前使用Astrea的產(chǎn)品已有超過(guò)21個(gè)生產(chǎn)工藝通過(guò)了FDA和EMA的批準(zhǔn)。Astrea Bioseparations在全球擁有3個(gè)研發(fā)和生產(chǎn)基地，專(zhuān)注為生物大分子和CGT領(lǐng)域提供行業(yè)層析介質(zhì)和技術(shù)服務(wù)。Astrea Bioseparations推出的基于納米纖維的新型層析技術(shù)，解決了傳統(tǒng)生物分離工具載量低和工藝耗時(shí)問(wèn)題，實(shí)現(xiàn)更快、更環(huán)保、更具成本效益的純化過(guò)程，符合當(dāng)今生物治療創(chuàng)新的需求。
西美杰是Astrea Bioseparations中國(guó)區(qū)代理，為用戶提供完善的技術(shù)支持與售后服務(wù)。
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