EOMA 小鼠血管內(nèi)皮瘤細胞/惡性

EOMA 小鼠血管內(nèi)皮瘤細胞/惡性，是一種內(nèi)皮細胞系，R Auerbach 于 1980 年來源于成年小鼠中產(chǎn)生的混合血管內(nèi)皮瘤?？捎糜谛难芗膊⊙芯俊＿@些細胞合成血管緊張素轉(zhuǎn)換酶，表達乙酰化低密度脂蛋白的表面受體，產(chǎn)生血小板反應素，并顯示血管性血友病因子抗體的細胞內(nèi)染色。組織蛋白酶L 由EOMA 細胞分泌，負責內(nèi)皮抑素 L 的產(chǎn)生。盡管 EOMA 細胞中存在組成型細胞因子基因表達，但通過與脂質(zhì)體包封的血紅蛋白（LEH）孵育，IL-6 mRNA 的水平顯著升高。這些細胞組成型表達由抗體MECA-99鑒定的血管地址。細胞表現(xiàn)出特征性的內(nèi)皮細胞特性，例如在基質(zhì)膠上重排成管狀結(jié)構(gòu)，并在匯合時保留鵝卵石形態(tài)。它們在體外的行為方式類似于微血管內(nèi)皮細胞。細胞特性：形態(tài)：內(nèi)皮細胞樣,貼壁生長用途：僅供科研使用

培養(yǎng)條件：
1準備 DMEM培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；雙抗，1%。

 2：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37 攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%

常溫發(fā)貨：
收到后 T25 瓶消毒再放置培養(yǎng)箱靜置 2-3 小時后觀察密度和狀態(tài)拍照2-3 張反饋給銷售，密度達標就可以傳代。前期傳代比例 1:2，等再次長滿后傳代時建議凍存其中一整瓶成1個1ml 凍存管，另外一瓶繼續(xù)傳代，反復凍存 2-3 只后才擴增做實驗，以防突發(fā)情況引起斷種。干冰發(fā)貨：常規(guī)細胞發(fā)貨凍存管 2 只，復蘇 1 只，另外一只備用，第一個復蘇不成功時嚴格按照廠家要求復蘇第二個，均沒有復蘇成功的情況即時留存復蘇照片通知銷售。
貼壁細胞參考：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。 2. 加入 0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA 于培養(yǎng)瓶中（T25 瓶1-2mL，T75 瓶2-3mL），置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml 含10%FBS 的培養(yǎng)基來終止消化。 3.輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 3-5min，棄去上清液，補加1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按 1：2 的比例分到新 T25 瓶/6cm 培養(yǎng)皿中，添加 6-8ml 按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按 1:2~1:5 的比例進行。
細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前 3 代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。4）運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。懸浮細胞參考：懸浮狀態(tài)下生長的細胞，可以通過向培養(yǎng)瓶中添加培養(yǎng)基來維持細胞的生長狀態(tài)，一般情況下細胞密度維持在 1×105~1×106 個/mL（不同細胞對密度要求不同，）可以維持細胞的正常生長。如需分瓶可以將細胞懸液收集到離心管中 1000rpm，離心 5min，棄去上清，補加1-2mL 培養(yǎng)液后重懸混勻后將細胞懸液按 1：2 的比例分到新 T25 瓶中，添加 6-8ml 按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按 1:2~1:4 的比例進行。

EOMA 小鼠血管內(nèi)皮瘤細胞/惡性