NobleRyderD9038  聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒 Poly-Gel DNA Extraction Kit

聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒 質(zhì)粒提取

產(chǎn)品貨號(hào)：D9038

產(chǎn)品名稱：聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒 Poly-Gel DNA Extraction Kit

英文名稱：Poly-Gel DNA Extraction Kit

產(chǎn)品規(guī)格：20T/50T

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

儲(chǔ)存條件：RT，復(fù)檢期1年

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyderD9038  聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒本試劑盒采用可以高效、專一結(jié)合DNA的硅基質(zhì)材料和du特的緩沖液系統(tǒng)，從聚丙烯酰胺凝膠上回收DNA片段，同時(shí)除去蛋白質(zhì)、其它有機(jī)化合物、無(wú)機(jī)鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì)。使用本試劑盒回收的DNA可適用于后續(xù)各種常規(guī)操作，包括酶切、PCR、測(cè)序、文庫(kù)篩選、連接和轉(zhuǎn)化等實(shí)驗(yàn)。

操作步驟（僅供參考）：

第一次使用前請(qǐng)先在15mL漂洗液中加入60mL無(wú)水乙醇，所有離心步驟均可使用臺(tái)式離心機(jī)在室溫下離心。

1.將單一的目的DNA條帶從聚丙烯酰胺凝膠中切下（盡量切除多余部分），放入1.5mL離心管中，稱取重量，用研磨杵將膠盡量擠壓碎。加入2倍體積的溶液A吹打混勻（每100mg膠加入200μL溶液A），75℃水浴30min。

2.用 1mL 的去尖吸頭吸取混合物至過(guò)濾柱中（將膠一起吸入，溶液過(guò)多時(shí)可分次加入），13,000rpm 離心 1min。將收集管中的濾出液轉(zhuǎn)入新離心管中。

3.取 6倍體積溶液B加入原離心管中（每100mg膠加入600μL），清洗管壁后加入過(guò)濾柱中(溶液過(guò)多時(shí)可分次加入)，顛倒過(guò)濾柱或輕輕吹打幾次混勻，13,000rpm離心1min。將所有收集的濾出液混合。

4.將總濾出液混勻后加入吸附柱中（溶液過(guò)多時(shí)可分次加入），13,000rpm離心30-60s，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放入收集管中。

5.向吸附柱中加入 600μL 漂洗液（使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇），13,000rpm 離心

30-60s，倒掉廢液，將吸附柱重新放入收集管中。

6.向吸附柱中加入600μL漂洗液，13,000rpm離心30-60s，倒掉廢液。

7.將離心吸附柱放回收集管中，13,000rpm 離心 2min，盡量除去漂洗液。將吸附柱開蓋置于室溫1-2min，che底晾干，以防止殘留的漂洗液影響下一步的實(shí)驗(yàn)。

8.將吸附柱放到一個(gè)干凈離心管中，向吸附膜中間位置懸空滴加適量65–70℃預(yù)熱的洗脫緩沖液20-30μL，室溫放置2min。13,000rpm 離心 2min 收集 DNA 溶液。注意：①為了增加回收效率，可將得到的溶液重新加入離心吸附柱中，13,000rpm 再次離心 1min。②洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于20μL，體積過(guò)小影響回收效率。③洗脫液的pH值對(duì)于洗脫效率有很大影響。若

用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在7.0-8.5之間。

9.DNA 回收產(chǎn)物直接后續(xù)實(shí)驗(yàn)或者-20℃保存。

注意事項(xiàng)：

1.電泳時(shí)最好使用新的電泳緩沖液，以免影響電泳和回收效果。

2.切膠時(shí)，紫外照射時(shí)間應(yīng)盡量短，以免對(duì)DNA造成損傷。

3.本試劑盒對(duì)<50bp DNA片段回收效率偏低（30%左右），如要回收，應(yīng)加大結(jié)合液的體積，延長(zhǎng)吸附和洗脫的時(shí)間。

4.回收率與初始DNA量和洗脫體積有關(guān)，初始量越少、洗脫體積越小，回收率越低。

聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒 質(zhì)粒提取

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D9038  聚丙烯酰胺凝膠DNA回收試劑盒 Poly-Gel DNA Extraction Kit  20T/50T