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CC96101 DH10B感受態(tài)

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     上海語純生物科技有限公司依托建立,是由具有資深生命科學、生物技術背景及人員共同創(chuàng)辦的技術型企業(yè)。
     公司專業(yè)經(jīng)營生物科學領域的實驗儀器、研究試劑和實驗室耗材,致力于向國內外生物科學研究人員提供優(yōu)質的服務。
     目前,公司推出的產品涵蓋了生物化學、分子生物學、免疫學、細胞生物學等相關領域,因優(yōu)質穩(wěn)定、性價比高等特點在廣大科研機構、研究院校及相關企業(yè)中贏得了良好的聲譽,從而建立了立體的營銷網(wǎng)絡和擁有廣泛的客戶資源。

    公司向廣大用戶提供優(yōu)質產品的同時,始終將客戶服務和技術支持放在比產品銷售更重要的位置上,公司聘請了專職、技術支持人員,為客戶提供專業(yè)性、個性化的技術服務。公司秉承"先做人,后做事"的理念,堅持"以質量為生命,以客戶為中心"的宗旨,把優(yōu)質的產品和貼心的服務奉獻給廣大客戶。





細胞,培養(yǎng)基,試劑,耗材儀器

供貨周期 現(xiàn)貨
產品簡介
DH10B 電擊感受態(tài)細胞只能用于電擊轉化,不能用于熱激轉化。DH10B 菌株來源于 MC1061 菌株,
mcrAmcrBC 及 mrr 突變使 DH10B 菌株適合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的 DNA (無論真
核生物還是原核生物的基因組 DNA 都能被高效的轉入 DH10B )。recA1 和 endA1 的突變有利于插
入 DNA 的穩(wěn)定和高純度質粒 DNA 的提取。φ80dlacZ?M15 標記的存在使 DH10B 可用于藍白斑篩
選,rpsL 賦予其鏈m素抗性。 DH10B 感受態(tài)細胞適用于大質粒的構建或者各種文庫構建,經(jīng)特殊
工藝制作,pUC18 質粒檢測轉化效率>1010cfu/μg DNA。
產品組成
組分
DH10B 感受態(tài)細胞
10 × 50 μL
100 ×50μL
定制
基因型FmcrA ?(mrr-hsdRMS-mcrBCφ80lacZ?M15 ?lacX74 recA1 endA1 araD139 ?(ara, leu)7697
galE15 galK λ- rpsL nupG
存儲條件
-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留;
電轉法轉化效率≥1010 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 0.1cm 電擊杯和杯蓋從儲存液中拿出倒置于干凈的吸水紙上5分鐘,待其瀝干水分,正置5分鐘,
使乙醇充分揮發(fā),待乙醇揮發(fā)干凈立即插入冰中,壓實冰面,電極杯頂離冰面 0.5 cm 以方便蓋上杯
蓋,冰中靜置 分鐘充分降溫。
2. -80℃保存的 DH10B 電擊感受態(tài)細胞插入冰中 分鐘,待其融化,加入目的 DNA (質?;蜻B接
產物)并用手撥 EP 管底輕輕混勻,避免產生氣泡,立即插入冰中。
A. 測定轉化效率使用 μl 10 pg/μ的對照質粒 pUC18;
B. 對于連接產物,請用乙醇沉淀 DNA 后加入適量 TE 緩沖液 (10mM Tris HCl, pH7.5; 1mM EDTA)
懸,DNA 濃度不超過 100ng/μl,體積不超過 5μl/50μ感受態(tài)。
3. 用 200 μ槍頭將感受態(tài)-DNA 混合物快速移到電擊杯中,避免產生氣泡,蓋上杯蓋。
4. 啟動電轉儀,設置參數(shù):C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV (此為 BioRad 電轉儀推薦參數(shù),也可按
所用電轉儀推薦的參數(shù)操作),將電擊杯快速放入電轉槽中,電擊完成快速插入冰中。
5. 2 分鐘后從冰中取出電擊杯,放室溫,加入 700 μ不含抗生素的無菌 S.O.C. 培養(yǎng)基(室溫),用
1ml 槍吹吸電擊杯底部數(shù)次混勻后,轉移到 50ml 離心管(BD Falcon50ml 錐形離心管等),向離心
管中補加 S.O.C. 培養(yǎng)基至 5ml37℃,225 rpm 復蘇 60 分鐘。




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