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作用機制(闡述):
卡爾科弗盧爾熒光增白劑(Calcofluor White Stain)是一種與真菌和其他生物體細胞壁中的纖維素和殼多糖結合的非特異性熒光染料,卡爾科弗盧爾熒光增白劑染色是一種快速檢測方法,可檢測許多酵母菌和病原性真菌比如微孢子蟲(Microsporidium)、棘阿米巴(Acanthamoeba)、肺囊蟲(Pneumocystis)、納氏蟲(Naegleria)和阿米巴(Balamuthia)物種。
伊文斯蘭(Evans blue)在該染料中用作復染劑,當使用藍色光激發(fā)(并非UV)檢測可降低組織和血細胞內的背景熒光信號。300-440nm的光譜范圍(Emax=433nm0.1M磷酸鹽pH 7.0;纖維素)可用作發(fā)射光譜,激發(fā)波長約在355nm。
染色步驟:
1.將待檢樣本置于一干凈載玻片上;
2.滴一滴卡爾科弗盧爾熒光增白劑(Calcofluor White Stain)和一滴10% 氫氧化鉀;
3.將蓋玻片置于樣本上,并靜置染色1min;
4.使用x100 to x400放大倍數(shù)紫外光下觀察。
染色結果(闡述):
真菌或寄生生物呈亮綠到藍色熒光,而其他材料呈紅-橙色熒光。若染色組織樣本會有非特異性反應。對于這些樣本可能會看到黃綠色背景熒光,但真菌和寄生結構熒光強度更明亮。
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