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RNA核酸提取及純化試劑盒

參考價 3490
訂貨量 ≥1
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱 上海撫生實業(yè)有限公司
  • 品牌 USP/美國
  • 型號
  • 產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
  • 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
  • 更新時間 2023/1/3 14:23:16
  • 訪問次數(shù) 1611
產(chǎn)品標(biāo)簽

RNA核酸提取純化試劑盒

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上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。

上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。

公司秉承“專注品質(zhì)、信守承諾、積極溝通、創(chuàng)新服務(wù)”的企業(yè)文化積極參與生物領(lǐng)域的技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)服務(wù),力求為我國科研事業(yè)更好的,更專業(yè)的服務(wù)!

公司售后服務(wù)宗旨:有質(zhì)量問題可申請退換,有技術(shù)疑問可隨時給于解答,一對一的客服服務(wù),客戶的需求也是我們不斷的更新服務(wù)。





elisa試劑盒,細(xì)胞,菌種,科研抗體,標(biāo)準(zhǔn)品

應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合

RNA和DNA提?。?/span>

裂解:裂解公式可能因您要提取 DNA 還是 RNA 而異,但共同點是含有高濃度離液鹽的裂解緩沖液。

Chaotropes(離液劑)的作用:Chaotrope會破壞氫鍵及疏水間的相互作用。離液鹽包括鹽酸胍、硫氰酸胍、尿素和高氯酸鋰。

洗滌劑:除了離液劑外,裂解緩沖液中通常還有一些去污劑,以幫助蛋白質(zhì)溶解和裂解。

jun酶和蛋白酶K:根據(jù)樣品類型,也可以使用酶進行裂解。

提取步驟:

1.從負(fù)八十冰箱取出樣品,放置于冰上緩慢解凍; (提前預(yù)冷離心機至4度)

2.待解凍后(紅色),加入200 μl氯仿(加入氯仿體積為Trizol體積的1/5),劇烈震蕩(乳白紅色),冰上靜置10 min。 (氯仿為有機溶劑,有效的使有機相和無機相迅速分離。有機相中主要是酚和蛋白結(jié)合,從而使得蛋白和RNA脫離,RNA進入水相。)

3.放置于預(yù)冷離心機,離心(4度,12000 rpm,15 min),離心后可見明顯分三層(上層無色透明水相為RNA層,中間很薄的乳白色為DNA層,下層為紅色為蛋白層)。

4.小心緩慢吸取上清,約400 μl(寧可少吸,也不要多吸取),置于另一個新的1.5 ml RNase-free EP管中,加入等體積的異丙醇,上下顛倒混勻,常溫靜置放置15 min。

5.離心(4度,12000 rpm,15 min),可見白色沉淀(有時細(xì)胞較少看不到沉淀,可放置負(fù)二十或負(fù)八十兩小時再繼續(xù)后面步驟)

6.棄上清,每管加入950 ul 75% 乙醇,上下顛倒混勻(切記不要用槍吹打混勻,這樣會造成RNA溶解)。

7.離心(4度,12000 rpm,10 min),可見底部明顯白色沉淀。

8.離心后,棄掉上清,放入離心機再次瞬離,用10 μl 的移液器洗去殘留液體, 開蓋晾干(約5 min)。

9.每個樣品根據(jù)沉淀大小加入適量DEPC水(一般20~30 μl,有時看不到沉淀,可加10 μl DEPC水溶解),吹打溶解RNA,十一樓酶標(biāo)儀測濃度,OD值(260/280=1.8-2.0)標(biāo)記,負(fù)八十保存。

備注:對于中性粒細(xì)胞提取RNA建議細(xì)胞數(shù)目大于2x106/樣品;

備注:操作過程中佩戴口罩。

PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
特點優(yōu)勢:

    1.特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到佳 。

    2.   重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為佳 。

    3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。

    4.   實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。

    5.   優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

    6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。

設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3’端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是 末及倒數(shù) 個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,被擴增的靶序列 有適宜的酶切位點,這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

注意事項

1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。

2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

3.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔di一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請再乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

5.底物請避光保存。

6.嚴(yán)格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

8.本試劑不同批號組分不得混用。

9.不能使用過期產(chǎn)品。

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。 

 


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